TTE159

UNIVERSIDAD CATÓLICA DE TEMUCO

FACULTAD DE RECURSOS NATURALES

DEPARTAMENTO DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y ACUÍCOLAS

CARRERA DE AGRONOMÍA

“EVALUACIÓN DE UN CONSORCIO DE HONGOS PROMOTORES DEL

CRECIMIENTO COMO ESTRATEGIA PARA MITIGAR EL DÉFICIT HÍDRICO EN

VID ( Vitis vinifera L.) CV. CHARDONNAY”

Trabajo de titulación modalidad Trabajo de

Investigación presentado a la Facultad de

Recursos Naturales como parte de los

requisitos para optar al título de:

INGENIERO AGRÓNOMO

RAÚL ANDRÉS CROUCHETT ROJAS

TEMUCO-CHILE

2022

“EVALUACIÓN DE UN CONSORCIO DE HONGOS PROMOTORES DEL CRECIMIENTO

COMO ESTRATEGIA PARA MITIGAR EL DÉFICIT HÍDRICO EN VID ( Vitis vinifera L.) CV.

CHARDONNAY”

“Evaluation of a fungus consortium as strategy to mitigate the water defici t in Chardonnay

grapevine ( Vitis vinifera L.)”

Raúl Andrés Crouchett Rojas (1)

1) Alumno tesista, Universidad Católica de Temuco. E-mail: rcrouchett2013@alu.uct.cl

ABSTRACT

Drought is one of the main problems derived from climate change. In this context, the vineyard production

has been negatively affected in many areas worldwide. In this study a consortium of fungal strains of

Aspergillus niger , Microdochium bolleyi and Westerdykella centenaria were tested to evaluate their effect

in both alleviating water stress and promoting carbon assimilation in Chardonnay grapevine. Fugal strains

were previously isolated from a rhizospheric soil of endemic Baccharis scandens and Solanum chilense

plants from the Atacama Desert. A two-level factorial experiment was applied on 32 two-year-old pot

grown plants in outdoor condition with fungus inoculation and deficit irrigation as factors. In leaves, net

photosynthesis ( A N ), stomatal conductance, substomatal carbon concentration, intrinsic water use

efficiency, leaf water potential ( Ψ L ) and SPAD units were evaluated. Two-way ANOVA and t-student test

(P ≤ 0.05) were used for statistical analyses. Results showed that gas exchange variables and Ψ L were

affected exclusively by deficit irrigation. On the other hand, SPAD units showed to be effected by both

factors. When the effect of inoculum was analyzed inside of irrigation treatment, the A N increased by

18.3% under full irrigation. Findings suggest that the inoculated fungus promoted leaf carbon assimilation

of Chardonnay grapevine when soil water availability was not limiting, probably due to enhanced

chlorophyll content as SPAD values also increased. Further research is needed to clarify if nutritional

traits of soils are effectively enhanced by the inoculated consortium.

Key words: photosynthesis, stomatal conductance, leaf water potential, water use efficiency, growth

promoting fungi.

1

RESUMEN

La sequía es uno de los principales problemas derivados del cambio climático. En este contexto, la

producción de viñedos se ha visto afectada negativamente en muchas zonas del mundo. En este estudio, se

probó un consorcio de cepas fúngicas de Asperguillus niger, Microdochium bolleyi y Westerdykella

centenaria para evaluar su efecto tanto en el alivio del estrés hídrico como en la promoción de la

asimilación de carbono en vid Chardonnay. Las cepas fúngicas se aislaron previamente de un suelo

rizosférico de plantas endémicas Baccharis scandens y Solanum chilense del desierto de Atacama. Se

aplicó un experimento factorial de dos niveles en 32 plantas cultivadas en macetas de dos años de edad en

condiciones al aire libre con inoculación de hongos y riego deficitario como factores. En hojas se evaluó

la fotosíntesis neta ( A N ), la conductancia estomática ( g s ), la concentración de carbono subestomatal ( C i ), la

eficiencia intrínseca del uso del agua, el potencial hídrico foliar (Ψ L ) y las unidades SPAD. Se utilizaron

ANDEVA de dos vías y la prueba t-student (P ≤ 0,05) para los análisis estadísticos. Los resultados

mostraron que las variables de intercambio g aseoso y Ψ L se vieron afectadas exclusivamente por el riego

deficitario. Por otro lado, las unidades SPAD se mostraron afectadas por ambos factores. Cuando se

analizó el efecto del inóculo dentro del tratamiento de riego, A N aumentó en un 18,3% bajo riego total. Los

hallazgos sugieren que los hongos inoculados promovieron la asimilación de carbono en las hojas de la

vid Chardonnay cuando la disponibilidad de agua en el suelo no fue limitante, probablemente debido a un

mayor contenido de clorofila a medida indirectamente como unidades SPAD. Se necesita más

investigación para aclarar si el consorcio inoculado mejora efectivamente los rasgos nutricionales de los

suelos.

Palabras clave: fotosíntesis, conductancia estomática, potencial hídrico de la hoja, eficiencia de uso de

agua, hongos promotores de crecimiento.

INTRODUCCIÓN

Según el informe entregado por OIV (2019), “Aspectos de la coyuntura mundial, situación del sector en

2018” la superficie vitícola mundial correspondiente al total de viñedos plantados alcanza los 7,4 millones

de hectáreas (mha) de las cuales, los países con mayor producción son España (969 mha), Francia (789

mha) e Italia (702 mha) concentrando el 50% de la superficie mundial (ODEPA, 2020). En Chile la

superficie de vides para vinificación alcanzó las 137.191,12 hectáreas, donde las regiones de O'Higgins y

del Maule, concentran más del 72% de la superficie nacional. En el ámbito regional, La Araucanía

presenta una superficie total de 79,55 hectáreas (SAG, 2020). La producción total de vinos del año 2019

2

alcanzó los 1.193.875.829 litros (SAG, 2019). En el año 2017, las exportaciones de vinos y mostos

superaron los 967 millones de litros, por un valor sobre los USD 2.067 millones (ODEPA, 2020).

Actualmente, Chile es el cuarto exportador mundial de vinos, siendo superado sólo por países europeos

como Francia, España e Italia.

El cultivo de la vid ( Vitis vinifera L.) es afectado por prolongadas sequías en las zonas de mayor superficie

nacional, lo cual reduce significativamente el potencial productivo de las viñas (Chaves y Oliveira, 2004;

De la Hera et al ., 2007; Chaves et al . , 2009; Bavestrello et al ., 2012; Melendres et al ., 2017). Esta pérdida

de productividad, se debe a la menor capacidad de fotosíntesis ( A N ) que manifiestan las plantas al

experimentar el estrés hídrico (Chaves, 1991; Ort, 2001; Flexas et al ., 2004). La menor tasa de fotosíntesis

neta ( A N ) es un resultado inevitable del cierre estomático que se produce como una estrategia fisiológica

primaria para reducir la pérdida de agua en la planta (Lawlor, 2002; Cifre et al ., 2005). Cuando el estrés es

moderado, la relación entre A N y la conductancia estomática (una medida indirecta del cierre estomático,

g s ) aumenta, indicando que la asimilación neta de CO 2 por unidad de agua transpirada mejora (Flexas et

al ., 2002, Flexas et al ., 2004; McAdam y Brodribb, 2014; Tomás et al ., 2014; Wang et al ., 2014; Xu et al .,

2014; Li et al ., 2015). Pese a lo anterior, la disminución de g s provoca una disminución en la

concentración de CO 2 en la cavidad subestomática ( C i ), y con ello, sustrato para la fotosíntesis lo que se

conoce como limitación estomática (Flexas et al ., 2002).

Considerando las proyecciones del cambio climático global se estima que la falta de agua para riego será

creciente (IPCC, 2014) lo cual impactará negativamente la producción vitícola nacional. Si bien es difícil

proyectar como los viticultores enfrentarán la escasez de agua proyectada, existen prácticas culturales

(riego deficitario controlado, riego presurizado, manejos específicos de la canopia, entre otras) y

biotecnológicas (variedades y portainjertos tolerantes al déficit hídrico), que pueden ayudar a enfrentar la

crisis potencial (Boyer, 1996; Chaves et al., 2002; Cifre et al ., 2005; Passioura, 2007). Dentro de las

herramientas biotecnológicas menos conocidas está el uso de microorganismos promotores de crecimiento

(OPC), los cuales pueden ser inoculados a semillas, follaje, raíces y suelo (Lopes et al ., 2021). Para el

último caso, se ha demostrado que los microbios no patogénicos asociados a las raíces pueden contribuir

positivamente a la promoción del crecimiento y a la mejora del estado sanitario de las plantas (Berg, 2009;

Abhilash et al ., 2016). Se han descrito mecanismos directos e indirectos mediante los cuales los OPC

inoculados al suelo, pueden ejercer su efecto positivo. Brevemente, i) los mecanismos directos, que son

aquellos que permiten una mejora sustancial de los elementos nutricionales del suelo, favoreciendo la

absorción de los mismos por parte de la planta y, 2) los mecanismos indirectos, los cuales permiten tanto

la modulación de las respuestas fitohormonales (Khan et al ., 2020), como la exudación de compuestos

volátiles, cuyo principal rol es repeler o atraer depredadores de insectos y nematodos que pueden dañar las

raíces de las plantas (Maffei, 2010).

3

Investigaciones recientes indican que los principales microorganismos utilizados para incrementar la

productividad de la agricultura son aquellos de los géneros Azospirillum , Bacillus , Burkholderia,

Enterobacter, Flavobacterium, Pseudomonas, Rhizobium, Frankia, Klebsiella, Clostridium, Trichoderma,

Beauveria, Serratia y Streptomyces (Abhilash et al ., 2016; Oosten et al ., 2017; Gouda et al ., 2018). No

obstante, existen muchos otros géneros descritos también como OPC. Por ejemplo, Rolli et al . (2015)

mostraron que cepas afiliadas a los géneros Acinetobacter, Sphingobacterium, Enterobacter y Delftia ,

aplicados en consorcio mejoraron el estado hídrico de las plantas y, finalmente, la biomasa.

Si bien el efecto benéfico de los OPC ha sido bien documentado en la literatura, la inoculación de hongos

rizosféricos aislados de plantas nativas del desierto de Atacama ha recibido menos atención, ni menos han

sido evaluados en vid vinífera. Sobre la base de lo anterior, la presente investigación tiene por objetivo

estudiar el efecto de un consorcio de hongos promotores del crecimiento aislados de la rizósfera de plantas

desérticas, sobre la mejora de parámetros fisiológicos de vid vinífera cv. Chardonnay, cultivadas en

maceta bajo dos dosis de riego.

MATERIALES Y MÉTODOS

Aislación de cepas fúngicas

Se utilizaron cepas de los hongos Asperguillus niger , Microdochium bolleyi y Westerdykella centenaria ,

que fueron obtenidas de la colección del Laboratorio de Biorremediación de la Universidad de La Frontera

(Temuco, Chile). Las cepas se aislaron de la rizósfera de dos plantas nativas del Desierto de Atacama,

Baccharis scandens y Solanum chilense (19 ° 18 ′ S y 69 ° 25 ′ W) y se identificaron de forma molecular.

Los hongos fueron aislados según el método descrito por Widden y Bisset (1972). Brevemente, el método

consiste en pasar 1 g de muestra de suelo a través de una serie de lavados en un tubo con filtros sucesivos

de malla metálica. El número de lavados del suelo para eliminar completamente la población fúngica

superficial o de resistencia (esporas, esclerocios, entre otros) se determina mediante una curva de lavado

realizada previamente. Tras el último lavado, las partículas retenidas en el filtro más pequeño son

transferidas a placas de Petri con medio de cultivo agar papa dextrosa (PDA). Las placas se incuban a

28°C durante una semana y los hongos que crecen se subcultivan en placas de Petri con el mismo medio

PDA. Los hongos aislados fueron almacenados a 4ºC con subcultivos periódicos. La actividad promotora

de crecimiento de cada cepa, se muestra en el Cuadro 1.

4

Cuadro 1 . Cuantificación de la producción de ácido indol acético (IAA) en las cepas evaluadas y su

capacidad para solubilizar fosfato, producir sideróforos y poliamina y su tolerancia a la sal.

Table 1 . Quantification of indole acetic acid (IAA) production, capacity of phosphate solubilization,

siderophores and polyamine production and salt tolerance of evaluated strains.

IAA (mg L -1 )

Producción de sideróforos †

Producción de poliamina

Tolerancia a la sal (%)

Identificación molecular

Solubilización de fosfato ††

0 % PEG

40% PEG

Westerdykella centenaria

8,1

13,4

+

+

-

5

Aspergillus niger

2,3

6,2

-

+

-

10

Microdochium bolleyi

10,2

25,1

-

-

-

7,5

† S ideróforo: (+) producción , (−) no produc ción; †† Solubilización de fosfato: (+) fosfato solubilizado, (−) fosfato no solubilizado.

Material vegetal

El experimento se realizó durante la temporada 2019-2020 en la Facultad de Ciencias Agropecuarias y

Forestales de la Universidad de la Frontera, ubicada en Av. Las Encinas 895, Temuco, Región de la

Araucanía (38°44'59.4"S 72°37' 06.1"W). Se utilizaron 32 plantas de vid del cultivar Chardonnay de dos

años de edad cultivadas al aire libre y en macetas de 20 litros. Las condiciones climáticas del sitio

corresponden a un clima templado bajo influencia mediterránea, con temperaturas que varían entre 25ºC

en enero y 3,1ºC en julio y un promedio anual de 205 días consecutivos sin heladas. La precipitación

media es de 1.152 mm y un periodo seco de 5 meses (Santibáñez, 2017).

Las macetas fueron llenadas con un Andisol de textura franco limosa, previamente esterilizado. En

invierno, las vides se podaron dejando un pitón de dos yemas por planta. Durante la temporada de

crecimiento los brotes fueron conducidos verticalmente con la ayuda de un sistema de soporte. Cuando las

plantas alcanzaron el estado fenológico de brotación (25 de septiembre de 2019), fueron fertilizadas con 6

g de fertilizante con tasa de liberación de 6 meses (16% N, 8% P 2 O 5 , 12% K 2 O, 2% MgO, 5% S, 0.02% B,

0,05% Cu, 0,42w% Fe, 0,06% Mn, 0,015 Mo, 0,02% Zn). Se realizaron tres aplicaciones fitosanitarias preventivas con Captan 80WP, siguiendo la dosis recomendada (4 kg ha -1 ).

Tratamientos

El conjunto de 32 macetas obtenidas, fue dividido al azar en dos grupos de 16 individuos para establecer

un tratamiento experimental inoculado (CI) y un control no inoculado (SI). El inóculo fue aplicado dos

veces durante la temporada de crecimiento (52 y 67 días después de la brotación (DDB), 15 y 30 de

5

noviembre), según Ortiz et al . (2019) la suspensión de esporas se ajustó a 5 x 107 esporas por mL usando

un hemocitómetro.

A partir de 77 DDB (9 de diciembre de 2019), cada tratamiento fue dividido al azar en dos subgrupos de

ocho plantas arregladas en cuatro repeticiones de dos plantas. Cada subgrupo fue regado

gravimétricamente a dos dosis diferentes: i) riego a 90% (R90%) de la capacidad de campo (CC) y, ii)

riego a 40% CC (R40%). Cada dos días, las macetas R90% recibieron alrededor de 3 litros cada una,

mientras que las R40% alrededor de 1,5 litros.

Intercambio de gases

El intercambio de gases de las hojas se midió cuatro veces a intervalos de tres días a partir de días después

de la segunda inoculación (14 de enero de 2020). Se utilizaron dos hojas maduras completamente

expandidas por repetición, las cuales fueron seleccionadas aleatoriamente desde la sección media del

pámpano (brote anual). Se utilizó un analizador de gas infrarrojo portátil (GFS-3000, Heinz Walz GmbH, Effeltrich, Germany), equipado con una cámara foliar de 4 cm 2 . Las condiciones ambientales dentro de la cámara se controlaron a: 1500 μ mol m -2 s -1 de PAR, 400 μmol CO 2 mol -1 de aire y temperatura a 20°C.

Después de 30 min de estabilización, las medici ones se realizaron desde las 10:00 h hasta las 14:00 h.

Cuando la cámara se instaló en la hoja, se esperaron unos cuatro minutos para lograr la estabilización de

los parámetros del equipo. Posteriormente, se registraron dos medidas tomadas a intervalos de 15 s de:

fotosíntesis neta a saturación de luz ( A N ), conductancia estomática al vapor de agua ( g s ) y concentración

de CO 2 en la cavidad subestomática ( C i ). En análisis sucesivos, se determinó eficiencia intrínseca del uso

del agua (WUE i = A N / g s ), para cada muestra. Unos 30 minutos antes de las mediciones, las macetas

fueron regadas hasta alcanzar el peso correspondiente.

Estado hídrico de las hojas

Posteriormente a la medición de intercambio de gases, las hojas se utilizaron para determinar su potencial

h ídrico (Ψ L ) mediante el uso de una cámara de presión (Modelo 600D; PMS Instrument Company,

Albany, EE. UU.). Cada hoja fue cuidadosamente cosechada desde la base del pecíolo y cubiertas con

papel humedecido (evitando las pérdidas por transpiración), para ser transportadas rápidamente a la

cámara de presión.

Diseño experimental y análisis estadístico

El experimento contempló dos factores, inoculación (dos niveles) y dosis de riego (dos niveles). Las

unidades experimentales fueron arregladas bloques completos al azar. Las medidas repetidas de

intercambio de gases y Ψ L fueron analizadas previamente con un análisis de varianza (ANDEVA) para

6

determinar si las medias de cada fecha difirieron entre sí. El análisis reveló que la fecha de medición no

afectó significativamente las variables, por lo tanto, los valores se promediaron. Para determinar el efecto

estadístico de los tratamientos y su interacción, se utilizó ANDEVA de dos vías (P ≤ 0,05).

Adicionalmente, se aplicó una prueba t-student para determinar el efecto de la inoculación sobre el

tratamiento de riego (P ≤ 0 ,05). El análisis de datos se llevó a cabo en "R" Commander (Rcmdr versión

1.8-3 en R versión 2.14.2. R Core Team, 2020).

RESULTADOS Y DISCUSIÓN

Variables de intercambio gaseoso

Los valores de las variables de intercambio gaseoso no presentaron diferencias significativas como

resultado de la presencia del inóculo (Cuadro 2). Estos resultados difieren de lo observado por Mikiciuk et

al . (2019) y Karoglan et al . (2021) trabajando con inoculaciones de hongos micorrízicos en plantas de

Cabernet Sauvignon y Pinot Noir y Passari et al . (2019) quienes experimentaron con inoculaciones de

Streptomyces thermocarboxydus en tomate ( Solanum lycopersicum ).

Al contrario de lo ocurrido en el tratamiento de inoculación, la dosis de riego mostró tener un efecto

significativo en todas las variables estudiadas. De esta manera, en R40% se observó una disminución de

los valores de A N , g s y C i de un 18,5%, 50,5% y 22,6% respecto a R90% (Cuadro 2). Estos resultados

evidencian que el déficit de riego aplicado generó un cierre estomático que disminuyó el ingreso de CO 2 a

la cámara subestomática, reduciendo, en consecuencia, la fotosíntesis. Este fenómeno se reconoce como

limitación estomática de la asimilación de carbono (Lawlor, 2002) y es reconocida como la respuesta

primaria de las plantas para evitar el déficit hídrico (Flexas et al ., 2002; Flexas y Medrano, 2002; Tomás

et al ., 2014; Martorell et al ., 2015). Esta estrategia evitativa, normalmente ha sido relacionada con señales

químicas hormonales, específicamente, con el aumento de ácido abscísico, a la conductividad hidráulica

(Rodriguez et al ., 2008; Speirs et al ., 2013), y otros mecanismos tales como, ajuste osmótico en la hoja

(Patakas y Nortsakis, 1999), el ajuste de pH de la xilema (Wilkinson y Davies, 2008) y señales eléctricas

(Grams et al ., 2007). Debido a que el tratamiento R40%, generó una disminución mayor de g s que de A N ,

WUE i aumentó 30% en R40% respecto a R90%. Esto concuerda con lo observado por Martorell et al .

(2015) en vid vinífera cv. Tempranillo.

La presencia del inóculo afectó diferencialmente a A N en el tratamiento de riego. Así, en el tratamiento

R90%, los valores de A N crecieron significativamente (+18,3%) con respecto al tratamiento control,

mientras que los valores de A N en R40% no presentaron diferencias (Cuadro 2). Esto sugiere que las cepas

fúngicas evaluadas ejercen su efecto promotor bajo condiciones más favorables de agua en el suelo.

Estudios recientes en vides han demostrado que la inoculación con OPC en vides mejoran la tolerancia a

7

estreses ambientales (Gianinazzi et al ., 2010), influyendo positivamente en distintos niveles de las plantas

(hormonal, fisiológico, metabólico y productivo) (Nikolaou et al ., 2003). Dicha influencia positiva, se

puede relacionar con la promoción del desarrollo radicular de la vid que conlleva a una mayor absorción

de agua y nutrientes (Hayman, 1983). A nivel de fotosíntesis, Rolli et al . (2015) observaron que las cepas

afiliadas a los géneros Pseudomonas y Acinetobacter estimularon la asimilación de carbono bajo

condición de estrés hídrico. De manera similar, la micorrización con las especies Claroideoglomus

etunicatum (Zhu et al ., 2012) y Glomus (Nicolas et al ., 2015) aumentaron la tasa de fotosíntesis neta en

plantas de maíz y vid cv. Crimson, respectivamente, creciendo en condiciones de sequía y humedad

óptima del suelo.

A diferencia de lo ocurrido con A N , la presencia del inóculo no afectó diferencialmente a g s , C i ni WUE i

(Cuadro 2) dentro del tratamiento de riego. No obstante, hubo una interacción significativa entre dosis de

riego e inoculación para g s , indicando que ambos tratamientos por sí solos no explican las variaciones de

esta variable. Así, en presencia del inóculo, hubo una tendencia hacia valores menores (-16%) y mayores

(+16%) de gs en R40% y R90%, respectivamente.

8

Cuadro 2 . Valores promedios (± desviación estándar) de variables de intercambio gaseoso en plantas de

vid cv. Chardonnay inoculadas (CI) y no inoculadas (SI) bajo dos condiciones de riego (R90%= 90% CC;

R40%= 40% CC).

Table 2 . Average values (± standard deviation) of gas exchange variables in grapevine plants cv.

Chardonnay inoculated (CI) and non-inoculated (SI) under two irrigation conditions (R90%= 90% CC;

R40%= 40% CC).

Riego (R)

Inóculo (I)

A N (µmol CO 2 m -2 s -1 )

g s (mmol de H 2 O m -2 s -1 )

WUE i (μ mol CO 2 mol -1 H 2 O)

C i (ppm)

R90%

CI

13,42 ±2,6 *

160,31 ±49,6

260,99 ±32,4

88,59 ±20,4

SI

10,96 ±2,5

134,45 ±22,9

259,15 ±29,2

81,31 ±18,0

Promedio de R90%

12,25 ±2,2 a

147,87 ±33,1 a

259,79 ±27,4 a

85,80 ±16,8 a

R40%

CI

8,52 ±2,3

66,90 ±20,1

193,09 ±71,2

129,93 ±23,2

SI

8,99 ±2,6

79,92 ±20,5

209,41 ±43,5

114,42 ±26,8

Promedio de R40%

8,75 ±2,1 b

73,10 ±18,5 b

200,86 ±50,4 b

122,54 ±21,2 b

Promedio de I

CI

11,08 ±2,7

115,64 ±24,5

229,17 ±51,0

108,45 ±21,5

SI

10,02 ±2,6

108,40 ±21,3

234,4 ±38,5

97,74 ±22,9

Interacción R x I

Valor P

0,057

0,049

0,456

0,496

El símbolo * representa las diferencias estadísticamente significativas del tratamiento de inoculación (t-student, P ≤ 0,05) aplicado

sobre cada condición de riego. Los valores seguidos por letras representan el efecto estadísticamente significativo del tratamiento

de riego (t-student, P ≤ 0,05). Se muestran los valores P de la interacción entre los tratamientos de inoculación y déficit de riego.

Potencial hídrico de la hoja e índice de clorofila

El potencial hídrico de la hoja medido a medio día es un indicativo del estado hídrico de las plantas

(McCutchan y Shackel, 1992), el cual ha sido utilizado tanto para la evaluación de riegos diferenciados

(Choné et al ., 2001; Girona et al ., 2006, Acevedo-Opazo et al ., 2010), como para el estudio de los efectos

de organismos rizosféricos en la fisiología de las plantas (Nikolaou et al ., 2003).

Según los resultados obtenidos, pod emos observar que los valores promedio de Ψ L en presencia del

inóculo no presentaron una diferencia significativa; a pesar de esto, se muestra una tendencia hacia una

disminución del Ψ L (-9,3%) en el tratamiento con inoculación con respecto al control (Cuadro 3).

Cuando se comparan los tratamientos de riego podemos observar un aumento significativo de los valores

Ψ L en el tratamiento R40% aumentando en 28,5% respecto a R90%. Según Van Leeuwen et al . (2009), los

9

valores de Ψ L entre -6 y -9 bar son considerados una condición de estrés leve, mientras que entre -11 y -14

bar son considerados como un estrés moderado a severo en vides viníferas.

En cuanto al índice de clorofila, los valores observados nos muestran diferencias significativas en los

promedios del tratamiento con inoculación, con un aumento de un 8% respecto al tratamiento control.

Caso similar se observa cuando se comparan los tratamientos de riego, donde los valores aumentaron en

9,8% en R90% con respecto a R40%. Esto concuerda con lo observado por Eftekhari et al . (2012) quienes

afirman que la inoculación de hongos micorrízicos arbusculares del género Glomus mosseae, G.

fasciculatum, G. intraradices mejoró el contenido de clorofila en vides cv. Asgari, Khalili, Keshmeshi, y

Shahroudi. Por otra parte, Zhu et al . (2012) también encontraron mayores cantidades de clorofila total

como resultado de la micorrización con la especie Claroideoglomus etunicatum en las hojas de plantas de

maíz que crecen bajo condiciones de estrés por sequía; aunque tales correlaciones no se observaron en

plantas que crecen en un suelo con un contenido óptimo de humedad. Al contrario, Ambrosini et al .

(2015) y Mikiciuk et al . (2019) no encontraron ningún efecto de la inoculación con micorrizas

arbusculares sobre el contenido de clorofila en vides cv. Pinot Noir, Regent y Rondo. De acuerdo con

Smith y Read (2008) el aumento en el contenido de clorofila de las hojas de las plantas inoculadas con

hongos micorrízicos puede ser causado por la mayor absorción de fósforo por parte de las raíces

inoculadas, mejorando indirectamente el proceso fotosintético (Karagiannidis et al ., 2007).

10

Cuadro 3 . V alores promedios (± desviación estándar) de las variables potencial hídrico de la hoja (Ψ L ) e

índice de clorofila en plantas de vid cv. Chardonnay inoculadas (CI) y no inoculadas (SI) bajo dos

condiciones de riego (R90%= 90% CC; R40%= 40% CC).

Table 3 . Average values (± standard deviation) of the variables water potential of the leaf ( Ψ L ) and

chlorophyll index in grapevine plants cv. Chardonnay inoculated (CI) and non-inoculated (SI) under two

irrigation conditions. (R90%= 90% CC; R40%= 40% CC).

Riego (R)

Inóculo (I)

Ψ L (bar)

Índice de clorofila (unidad SPAD)

R90%

CI

6,92 ±2,26

35,98 ±0,43 *

SI

6,82 ±2,40

32,74 ±0,50

Promedio de R90%

6,87 ±2,28 a

34,35 ±0,41 a

R40%

CI

8,77 ±2,18

32,13 ±0,53 *

SI

10,55 ±2,30

29,59 ±0,47

Promedio de R40%

9,62 ±2,37 b

30,98 ±0,43 b

Promedio de I

CI

7,80 ±2,37

33,87 ±0,44 A

SI

8,60 ±2,99

31,16 ±0,43 B

Interacción R x I

Valor P

0,18

0,50

El símbolo * representa las diferencias estadísticamente significativas del tratamiento de inoculación (t-student, P ≤ 0,05) aplicado

sobre cada condición de riego. Los valores seguidos por letras minúsculas y mayúsculas representan el efecto estadísticamente

significativo del tratamiento de riego e inoculación (t-student, P ≤ 0,05). Se muestra el valor P de la interacción entre tratamientos

riego (ANDEVA de dos vías, P ≤ 0,05).

CONCLUSIÓN

Los resultados obtenidos mostraron que las variables de intercambio gaseoso fueron más sensibles al

tratamiento de riego que al de inoculación. No obstante, el consorcio de hongos promotores del

crecimiento mejoró la asimilación de carbono en vid cuando el contenido a agua en el suelo fue menos

limitante, resultando en una tendencia hacia un aumento en la eficiencia de uso de agua en las hojas. El

aumento de la tasa de fotosíntesis bajo la presencia del inóculo puede explicarse por el aumento de los

valores SPAD, que sugieren un mejor estado nutricional de la hoja. Pese a que el índice de clorofila

aumentó también con el inóculo bajo la condición R40%, esto no implicó una mejora en A N , lo cual puede

explicarse por la limitación estomática detectada en este tratamiento.

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